慢病毒整合插入位点标准品扩容
发布时间:2025/05/30分类:技术文章来源:拉斯维加斯游戏大厅官网
慢病毒背景
慢病毒载体（Lentiviral vectors, LVs）是在人免疫缺陷病毒HIV-1的基础上改造而来的，可以将大量的遗传信息传递进宿主细胞，并且整合到细胞的基因组内，使其可以在细胞内稳定表达若干代。同时，由于它的毒力基因已经被剔除，作为假病毒可以在实验室内较为安全的使用。慢病毒载体可以转染多种细胞，包含原代细胞等难转染的细胞。
慢病毒在Car-T细胞疗法中的应用
基于慢病毒具有：
感染范围广、效率高，有效感染分裂和非分裂的细胞；
稳定性强，整合进基因组中，长期稳定表达外源的基因；
免疫原性低，安全性相对较高的特点，慢病毒被广泛应用于细胞治疗中。
CAR-T（Chimeric Antigen Receptor T-cell，嵌合抗原受体T细胞）疗法是一种突破性免疫疗法，通过基因改造患者的T细胞，使其表达特定的CAR（嵌合抗原受体），从而识别并杀伤肿瘤细胞。目前主要用于血液系统恶性肿瘤（如B细胞白血病、淋巴瘤），并逐步向实体瘤拓展。
慢病毒整合的特性
慢病毒是目前CAR-T主流转导方式（FDA已批准的CAR-T产品中，约90%采用LV），慢病毒整合在细胞内是半随机整合（偏好转录活跃区）。
1
慢病毒通过识别宿主表面受体，把RNA和蛋白转运至胞内；
2
病毒RNA逆转录形成线性 双链cDNA（含两端LTR序列）
3
整合酶识别LTR,cDNA被整合到宿主基因组中；
4
外源基因随宿主细胞分裂持续表达。
整合偏好性：
整合位点分析（Integration Site Analysis, ISA）是基因治疗产品（如CAR-T）临床开发和上市后监测的关键环节，其法规要求由各国监管机构（如FDA、EMA）制定，旨在评估基因组整合的潜在风险（如插入突变、克隆扩增）。
目前检测ISA的方法有LM-PCR、NGS、单细胞测序等，为了保证检测的准确性，拉斯维加斯游戏大厅官网开发了一系列慢病毒整合位点标准品供检测机构使用，作为品质衡量的标尺对检测能力进行判别。在前文 慢病毒整合位点标准品强势来袭一文中，已对单克隆多插入位点、单克隆单插入位点、性染色体插入位点 做了产品的说明及数据展示。近期科佰推出了5% 2% 整合频率的慢病毒多克隆多整合位点参考品，由多个单克隆整合位点产品混合而来，覆盖20个插入位点，分别来自11个不同染色体上的20个基因，如下表所示
Figure 1. 基因分布
Figure 2. 染色体分布
每个位点经过LM-PCR（用于识别已知DNA与相邻未知DNA的一种技术，可结合NGS，对IS进行高通量分析）、 NGS（捕获探针法测序）技术检测，Sanger测序验证，以及dPCR检测定标整合频率，确保插入位点的准确定位和整合频率的精准测量。
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如果您对我们的慢病毒多整合位点标准品感兴趣，或希望了解更多信息，请联系我们的销售团队。我们将竭诚为您提供最优质的产品和服务，助力您的实验室实现更精准、更高效的检测。
产品列表
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货号 |
名称 |
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慢病毒多克隆多整合位点参考品-5% |
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慢病毒多克隆多整合位点参考品-2% |
部分数据展示
5% chr3：4871944 ITPR1四种检测结果：
LM-PCR结果
NGS结果
Sanger结果
3'LTR+ITPR1 chr3_4871940
ITPR1 chr3_4871944+5'LTR
dPCR结果
